Перекрестный метод определения группы крови
Определение групп крови перекрестным способом – выявление в сыворотке изогемагглютининов α и β стандартными эритроцитами. Основа исследования — взаимодействие естественных агглютининов сыворотки α и β и соответствующих антигенов стандартных эритроцитов AB0.
Стандартные эритроциты являются 5 – 10 % взвесью свежих эритроцитов. Условия хранения – в изотоническом солевом растворе консерванта при + 4 °C. Допускается использование смеси эритроцитов от 2 – 3 лиц одной группы. При использовании перекрестного метода определения группы крови требуется хорошее освещение и температура воздуха в помещении 15 – 25 °C.
Порядок действий
- Отобрать 3 – 5 мл исследуемой крови в пробирку без стабилизатора.
- Отстоять сыворотку 1,5 – 2 часа.
- Однократно отмыть стандартные эритроциты в 0,9 % растворе NaCl.
- Промаркировать лунки планшета: 0(I), A(II), B(III).
- Разместить по две капли (приблизительно 0,1 мл) сыворотки в лунки.
- Добавить в лунки по 0,03 мл стандартных эритроцитов групп 0, A, B.
- Чистыми палочками перемешать сыворотку и эритроциты.
- Покачивать планшет на протяжении 5 минут.
- Проверить наличие агглютинации в каждой лунке.
Результаты исследования
| Групповая принадлежность | Стандартные эритроциты | ||
|---|---|---|---|
| 0(I) | A(II) | B(III) | |
| 0(I) | - | + | + |
| A(II) | - | - | + |
| B(III) | - | + | - |
| AB(IV) | - | - | - |
«+» - наличие, «-» - отсутствие агглютинации.
- Агглютинация со стандартными эритроцитами A(II) и B(III) свидетельствует о наличии в сыворотке агглютининов α и β. Исследуемая кровь – 0(I).
- Реакция в лунке с эритроцитами B(III) говорит о наличии агглютинина β. Группа A(II).
- Агглютинация с эритроцитами A(II) – свидетельство наличия агглютинина α. Результат исследования крови – B(III).
- Отрицательный результат во всех трех лунках указывает на отсутствие обоих агглютининов. Кровь - AB(IV).
Определение групп крови AB0 перекрестным способом в обязательном порядке дополняет обнаружение антигенов A и B в реакции прямой агглютинации с использованием цоликлонов.
