Цоликлоны
Цоликлоны диагностические жидкие — моноклональные реагенты для типирования крови человека по антигенам эритроцитов. Исследование проводят посредством смешивания реагента с анализируемыми эритроцитами. Принцип теста основан на реакции гемагглютинации. Наступает в результате специфического взаимодействия антигенов эритроцитов с соответствующими реагентами. Положительный результат характеризуется образованием агглютинатов и просветлением поля реакции. В случае отсутствия антигена агглютинация не наблюдается. Приводим описание моноклональных реагентов для типирования крови по системе AB0 и выявления антигена D системы Резус.
Цоликлоны для типирования по системе AB0
Цоликлоны анти-А, анти-В, анти-АВ, анти-А1 применяются с целью типирования группы крови человека по антигенам эритроцитов АВ0 в прямой реакции гемагглютинации. Реагент анти-A1 позволяет выявить варианты групповых антигенов А: А1, А2 и АВ: А1В, А2В.
Действующее начало анти-А, анти-В и анти-АВ – мышиные моноклональные антитела класса IgM. Основа цоликлона анти-А1 – мышиные моноклональные IgM-антитела или растительный лектин (фитогемагглютинин).
Специфичность
- Реагент анти-А агглютинирует эритроциты, содержащие антигены А1 и А2. Реакция отрицательная с эритроцитами групп 0 и В.
- Анти-В дает положительную реакцию с эритроцитами группы В. Не агглютинирует кровяные тельца групп 0 и А.
- Цоликлон анти-АВ вызывает положительную реакцию с А1, А2, В. Дает отрицательную реакцию с эритроцитами группы 0.
- Анти-А1 агглютинирует только эритроциты групп А1, А1В.
Моноклональные реагенты полностью моноспецифичны по иммунохимическим характеристикам и не вызывают неспецифической агглютинации.
Результаты AB0 типирования
| Результат реакции | Групповая принадлежность | Результат реакции | Групповая принадлежность | ||
|---|---|---|---|---|---|
| Анти-А | Анти-В | Анти-АВ | Анти-А1 | ||
| - | - | - | О (I) | ||
| + | - | + | А (II): А1 (II) или А2 (II) | + | А1 (II) |
| - | А2 (II) | ||||
| - | + | + | В (III) | ||
| + | + | + | АВ (IV): А1В (IV) или А2В (IV) | + | А1В (IV) |
| - | А2В (IV) | ||||
(+) – наличие агглютинации;
(-) – отсутствие агглютинации;
– окончательное заключение о групповой принадлежности.
В случае наличия агглютинации анализируемых эритроцитов со всеми четырьмя реагентами (группа А1В) убедитесь в отсутствии спонтанной аутоагглютинации. Проведите дополнительное контрольное исследование образца с 0,9 % раствором NaCl.
На плоскости смешайте одну каплю (0,01 – 0,05 мл) крови с одной каплей (0,1 мл) NaCl. В случае отсутствия агглютинации отнесите кровь к группе А1В (IV). В случае появления спонтанной агглютинации повторите типирование с использованием отмытых эритроцитов данного образца.
Цоликлон анти-D Супер или анти-D IgM
Цоликлон анти-Д IgM Супер применяется с целью определения резус-принадлежности крови с помощью обнаружения антигена D эритроцитов. Реагент агглютинирует большинство D-положительных образцов крови за исключением эритроцитов с частичным антигеном DVI.
В случае отсутствия агглютинации с анти-D IgM проводят уточняющее исследование образцов крови доноров с помощью Цоликлона анти-D IgG. Реагент выявляет наличие слабых антигенов или вариантов антигена D. Тест с анти-D IgG для реципиентов не проводят.
Действующее начало диагностикума – человеческие моноклональные IgM-антитела, продуцируемые гетерогибридомной линией клеток человек-мышь.
Специфичность анти-D IgM
Реагент агглютинирует D-положительные эритроциты. Не дает реакцию агглютинации с D-отрицательными эритроцитами и кровяными тельцами с частичным антигеном DVI.
Цоликлон анти-D IgG
Цоликлон анти-D IgG используется для выявления всех разновидностей антигена D эритроцитов. Позволяет обнаружить слабый антиген Du и варианты DI - DVII. Находит применение в непрямом антиглобулиновом тесте и в реакции конглютинации с желатином.
Реагент применяют:
- в качестве уточняющего диагностикума для выявления частичных вариантов антигена DI - DVII в образцах эритроцитов доноров, которые в реакции с моноклональными анти-D IgM реагентами были первоначально определены как D-отрицательные;
- в качестве самостоятельного реагента для выявления всех разновидностей антигена D: D, Du, DI - DVII.
Действующее начало диагностикума – человеческие моноклональные IgG-антитела. Продуцируются гетерогибридомной линией клеток человек-мышь.
Специфичность цоликлона анти-Д IgG
Анти-D IgG агглютинирует все разновидности D-положительных эритроцитов: D, Du, DI - DVII. Не вызывает реакцию с D-отрицательными кровяными тельцами.
- Постановление Правительства Российской Федерации от 04.07.2020 № 986 «Об отмене отдельных актов федеральных органов исполнительной власти, признании не действующими на территории Российской Федерации отдельных актов и иных документов Министерства здравоохранения РСФСР и признании не действующими на территории Российской Федерации отдельных актов и иных документов Министерства здравоохранения СССР, содержащих обязательные требования, соблюдение которых оценивается при осуществлении государственного контроля за обеспечением безопасности донорской крови и ее компонентов»;
- Постановление Правительства Российской Федерации от 22.06.2019 № 797 «Об утверждении Правил заготовки, хранения, транспортировки и клинического использования донорской крови и ее компонентов и о признании утратившими силу некоторых актов Правительства Российской Федерации»;
- Приказ Минздрава России от 20.10.2020 г. № 1134н «Об утверждении порядка медицинского обследования реципиента, проведения проб на индивидуальную совместимость, включая биологическую пробу, при трансфузии донорской крови и (или) ее компонентов»;
- Приказ Минздрава России от 28.10.2020 г. № 1166н «Об утверждении порядка прохождения донорами медицинского обследования и перечня медицинских противопоказаний (временных и постоянных) для сдачи крови и (или) ее компонентов и сроков отвода, которому подлежит лицо при наличии временных медицинских показаний, от донорства крови и (или) ее компонентов».
- Рагимов, А.А. Трансфузионная иммунология/А.А. Рагимов, Н.Г. Дашкова. — М.: Медицинское информационное агентство, 2004. — 279 с.
- Шевченко, Ю.Л. Безопасное переливание крови/Ю.Л. Шевченко, Е.Б. Жибурт. — СПб.: Питер, 2000. — 308 с.
